by సూర్య | Thu, Mar 26, 2020, 04:46 PM

కోవిడ్19 కోసం ‘రివర్స్ ట్రాన్స్క్రిప్షన్ పాలిమరేస్ చైన్ రియాక్షన్’ (RT-PCR) పరీక్షను ఉపయోగిస్తున్నారు. ఇందులో నమూనాలోని ఆర్ఎన్ఎను సంగ్రహించి డిఎన్ఎకి మార్చబడుతుంది. ఆ తరువాత దీనిని “ప్రైమర్స్” - న్యూక్లియిక్ ఆమ్లం యొక్క చిన్న సంశ్లేషణ శకలాలు ఉపయోగించి విస్తరిస్తారు. ఫ్లోరోసెంట్ డై అనేది ప్రవేశపెడతారు. నమూనా డిఎన్ఎ సమక్షంలో మాత్రమే విస్తరిస్తుంది. ఈ పరీక్ష ఎలా పనిచేస్తుందనే విషయాలను సీనియర్ ప్రొఫెసర్ మరియు ఇన్స్టిట్యూట్ ఆఫ్ మెంటల్ హెల్త్ అండ్ న్యూరోసైన్సెస్ (నిమ్హాన్స్) బెంగళూరు పబ్లిక్ హెల్త్ వైరాలజీ హెడ్ వి కొన్ని విషయాలను తెలిపారు. మార్చి 21, 2020 నాటికి, భారతదేశంలో కోవిడ్19 కేసులు 258 ధృవీకరించబడ్డాయి. 275,000 మందికి పైగా ప్రజలకు కరోనా పరీక్షలు చేశారు. ప్రపంచవ్యాప్తంగా 11,000 మందికి పైగా మరణించారు. భారతదేశంలో సుమారు 9% (258 మందిలో 23 మంది) రోగులు డిశ్చార్జ్ అయ్యారని హెల్త్ చెక్ డేటాబేస్ కరోనావైరస్ మానిటర్ తెలిపింది. గత 14 రోజులలో అంతర్జాతీయ ప్రయాణాన్ని చేపట్టిన వ్యక్తులందరూ 14 రోజులు ఇంటి నిర్బంధంలో ఉండాలని, జ్వరం, దగ్గు మరియు శ్వాస తీసుకోవడంలో ఇబ్బంది ఉన్న లక్షణాలను చూపిస్తే మాత్రమే పరీక్షించాలని ఐసిఎంఆర్ తెలిపింది. కోవిడ్-19 పరీక్ష ఎలా నిర్వహించబడుతుందో ఇప్పుడు తెలుసుకుందాం.
దశ 1: నమూనా సేకరణ: ఈ నమూనాను గొంతు మరియు నాసికా శుభ్రముపరచడం ద్వారా సేకరించి, ప్రయోగశాలకు పంపుతారు.
దశ 2: ఆర్‌ఎన్‌ఎను సంగ్రహిస్తుంది: జంతువులలో ఉద్భవించే కరోనావైరస్లోని జన్యు పదార్ధం ఒక RNA - రిబోన్యూక్లియిక్ ఆమ్లం - మరియు మానవులలో మాదిరిగా DNA (డియోక్సిరిబోన్యూక్లిక్ ఆమ్లం) కాదు. తదుపరి దశ ఏమిటంటే, RNA లోని నమూనాలోని అన్నిటి నుండి - మానవ కణాలు, ప్రోటీన్లు, ఎంజైమ్‌లు - ఆ వైరల్ జన్యు సంకేతాన్ని తెలుపుతుంది. రసాయనాల ద్వారా సెంట్రిఫ్యూగల్ ప్రక్రియను ఉపయోగించి ఇది చేస్తారు. ఆ తర్వాత నమూనా దిగువన ఆర్ఎన్ఎ అనేది సేకరించబడుతుంది.
దశ 3: డిఎన్ఎకి మార్పిడి: RT ఎంజైమ్ RNA ను DNA గా మార్చడానికి ఉపయోగించబడుతుంది. ఒక స్ట్రాండ్ నుండి రెండు వరకు వెళుతుంది. ఈ ప్రతి చర్యను సెటప్ చేయడానికి, మీకు “మాస్టర్ మిక్స్” అవసరం. ఇందులో సాధారణంగా న్యూక్లియోటైడ్లు (కొత్త డిఎన్‌ఎ చేయడానికి), టాక్ డిఎన్‌ఎ పాలిమరేస్ (డిఎన్‌ఎను విస్తరించడానికి ఒక ఎంజైమ్), పిసిఆర్ బఫర్‌లు (టాక్ డిఎన్‌ఎ పాలిమరేస్‌కు సరైన పరిస్థితులను సృష్టించడానికి) ) మరియు మెగ్నీషియం లవణాలు ఉపయోగిస్తారు.

దశ 4: డిఎన్ఎని విస్తరించడం: ప్రైమర్స్ - న్యూక్లియిక్ ఆమ్లం యొక్క చిన్న సంశ్లేషణ శకలాలు - విస్తరించాల్సిన ప్రాంతాన్ని నిర్వచించడంలో సహాయపడతాయి. ఈ మిశ్రమాన్ని పిసిఆర్ యంత్రానికి కలుపుతారు. ఇది 15-20 సెకన్ల పాటు ఉష్ణోగ్రతని పెంచుతుంది మరియు తగ్గిస్తుంది. ఒక చక్రంలో, DNA స్ట్రాండ్‌ను వేరు చేసి చల్లబరచడానికి ఉష్ణోగ్రత పెంచుతారు. ఆ తర్వాతి దశలో ఉష్ణోగ్రతను 72 డిగ్రీల సెల్సియస్ కు పెంచుతారు. దీనిలో కొత్త స్ట్రాండ్ సంశ్లేషణ చేయబడుతుంది. RT-PCR కోసం, అలాంటి 40 చక్రాలను చేయవలసి ఉంటుంది. దీనికి సుమారు గంట సమయం పడుతుంది. ప్రతి చక్రం ఒకటిన్నర నిమిషాలు పాటు ఉంటుంది.
దశ 5: ఫలితాలు: పిసిఆర్ యంత్రంలో తగినంత డిఎన్‌ఎ ఉత్పత్తి అయిన తర్వాత, దానిని గుర్తించడానికి సిద్ధంగా ఉంటుంది. పరీక్షలో ఫ్లోరోసెంట్ రంగు లేదా ‘ప్రోబ్’ కలుపుతారు. డీఎన్‌ఏ ఉంటే అది ప్రకాశిస్తుంది. "DNA యొక్క కాపీల సంఖ్య పెరిగేకొద్దీ, వెలువడే కాంతి పరిమాణం కూడా పెరుగుతుంది. "పిసిఆర్ మెషీన్లో ఒక ప్రత్యేక కాంతి-కొలిచే పరికరం ఈ ఫ్లోరోసెన్స్ నమూనాలను చూపుతుంది. వాటిలో ఏ నమూనాలలో వైరస్ ఉందో లేదో తెలుసుకోవచ్చు.
దశ 6: వైరస్ ఉందో లేదో నిర్దారిస్తుంది: ఒక గంటలో, పిసిఆర్ అయిపోతుంది, ఆపై అవసరమైన డిఎన్ఎ విస్తరించబడిందా లేదా అని యంత్రం కనుగొంటుంది. ఆ విస్తరణలో నమూనా ద్వారా వైరస్ ఉందో లేదో నిర్దారణ అవుతుంది.